基于慢病毒稳转的过表达、敲除、干扰 2025年7月25日 为什么选择慢病毒表达系统? 慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别于一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。该类载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而使目的基因或片段持久性表达。对于一些较难转染的细胞——如原代细胞、干细胞、部分悬浮细胞等,使用慢病毒载体,能大大提高目的基因或目的shRNA的转导效... 阅读更多
原代细胞永生化 2025年7月24日 细胞作为组成生物体的基本单位一直是重要的研究材料。原代细胞由于其功能、代谢、形态等方面接近体内细胞而备受青睐。但原代细胞的增殖潜力有限,无法长期传代,从而难以在一次分离中获得大量细胞。随着研究人员的不断努力,如今我们已经有了让原代细胞“长生不老”的手段--原代细胞永生化。 当前的技术手段中,基于慢病毒载体的猿猴病毒40(SV40)大T抗原和端粒酶(hTERT)诱导的原代细胞永生化最为简单可靠,应用... 阅读更多